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健脾疏肝颗粒对糖尿病小鼠糖脂代谢的实验研究

更新时间:2009-03-28

糖尿病是一种代谢性疾病,是引起众多病发病的主要元凶,包括慢性肾病、糖尿病肾病、心血管疾病、以及视网膜病变等[1]。WHO预测,到2030将达到4.39亿人患糖尿病,严重威胁到人类的健康,因此,研究糖尿病的治疗药物具有重大意义。疏肝健脾颗粒主要有黄芪党参、丹参等组成,具有补气健脾、滋养津血、疏肝理气、活血通络之效,研究表明其有治疗高脂血症的作用[2]。因此,本课题将对于疏肝健脾颗粒对于糖尿病小鼠糖脂代谢的影响进行研究。

1 材料与仪器

1.1 材料

SPF级C57BL/6J小鼠,雄性,体重18~22g,由广东省医学实验动物中心提供,生产许可证号:SCXK(粤)2015-0001。

健脾疏肝颗粒(由黄芪、炒苍术各30g,丹参20g,党参、麦芽、太子参、川芎各15g,当归12g等组成),运用现代工艺加工成颗粒剂。链脲佐菌素(STZ)(购于美国Sigma公司,批号:040M1367),临用时以pH4.5的0.1mol/L枸橼酸缓冲液溶解。盐酸二甲双胍(默克雪兰诺,批号:AAH5770)。高脂饲料配方组成:基础饲料52%,酪蛋白12%,蔗糖10%,猪油24%,磷酸氢钙2%,复合多维0.1%,矿物质0.4%,盐0.2%,共100.7%。由广东省医学实验动物中心加工提供。

1.2 仪器

BS224S万分之一电子天平(德国SARTORTUS);UV-2501PC型紫外分光光度计(日本SHIMADZU);Bio-RAD 550全波长酶标仪(美国伯乐公司);JTS-3WQ电子秤(深圳钰恒电子有限公司)。血糖仪(安妥超越,RV1104,Abbott);全自动生化分析仪(日立,型号:7180)。

2 实验方法

2.1 造模及动物分组

小鼠适应性喂养一周,随机分为正常组(10只)和造模组(40只),造模组给予高脂喂养4周后,小鼠禁食6小时后腹腔注射STZ50mg/kg,连续5天,一周后用血糖仪检测空腹血糖,将血糖≥16.7mmol/L的小鼠为成模。将成模的小鼠分为模型组、盐酸二甲双胍组、健脾疏肝颗粒低剂量组、健脾疏肝颗粒高剂量组,每组10只。

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2.2 剂量设置

由表5结果可知,口服相同剂量的葡萄糖后,所有小鼠血糖均呈现先升高,后逐步下降,呈现葡萄糖吸收代谢的过程。糖负荷后,与正常组比较,模型组小鼠血糖各时间点均有显著的升高(p<0.01);与模型组比较,糖负荷后,各给药组小鼠血糖均明显较低(p<0.01或p<0.05)。见表5。

2.3 指标检测

表3实验结果显示,各给药均无促进胰岛素分泌作用。与正常组比较,模型组FBS、FINS明显升高,ISI显著下降,HOMA-IR显著增加(p<0.01)。与模型组比较,盐酸二甲双胍和疏肝健脾颗粒低、高剂量均可以显著降低FBG、FINS以及改善胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗的作用(p<0.01),见表3。

2.4 实验统计方法

给药4周后,各治疗组小鼠多饮、多尿等症状及精神状态均较模型组有一定程度的改善,且疏肝健脾颗粒的低、高剂量组体重低于模型组(p<0.01)。体重数据见表1。

3 结果

3.1 疏肝健脾颗粒对小鼠一般症状的改善

所有计量资料以均数加减标准差表示,多组间均数的比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)。采用spss18.0进行统计分析,P<0.05为差异具有统计学意义。

 

1 疏肝健脾颗粒对糖尿病小鼠体重的影响

  

分组剂量g/kg给药前给药2周给药4周正常组-24.50±0.8129.81±0.9831.90±0.54模型组-24.13±0.7128.72±1.3731.08±1.29盐酸二甲双胍组0.224.61±0.6228.30±1.5428.89±0.92疏肝健脾颗粒9.324.82±0.8528.32±0.9529.06±0.8318.624.73±0.7428.31±0.6228.75±0.69

注:与模型组比较,*p<0.05,**p<0.01。

3.2 疏肝健脾颗粒对小鼠血糖的改善

表4结果显示,与正常组比较,模型组小鼠血清TG、TC水平明显升高,HDL-C水平降低,差异具有统计学意义(p<0.01或p<0.05)。与模型组比较,盐酸二甲双胍组、疏肝健脾颗粒低、高剂量组血清TG、TC显著降低(p<0.01或p<0.05),LDL-C水平升高(p<0.05),见表4。

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2 疏肝健脾颗粒对糖尿病小鼠血糖的影响

  

分组剂量g/kg给药前给药2周给药4周正常组-9.73±1.149.66±1.169.17±0.84模型组-21.16±2.91##21.25±2.70##22.13±2.64##盐酸二甲双胍组0.221.04±1.6817.96±0.8415.49±0.53疏肝健脾颗粒9.322.02±2.3819.54±2.1815.27±0.8418.622.29±2.4118.09±0.8215.22±0.82

注:与正常组比较,##p<0.01,与模型组比较,**p<0.01。

3.3 疏肝健脾颗粒对小鼠胰岛素敏感和抵抗的影响

血糖指标检测:给药之前以及给药2周、给药4周进行血糖检测。血清指标检测:给药结束后分别进行糖耐量(OGTT)实验、空腹血糖(FBG)、血清胰岛素水平(FINS)、血脂[甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)]检测,并计算胰岛素敏感性指数(ISI,ISI=Ln[1/(FINS×FBG)])和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR,HOMA-IR=(FBG×FINS)/22.5)。OGTT检测方法:给小鼠灌服葡萄糖溶液(1g/kg)后0、30、60、120min,尾静脉取血,测定各个时间点的血糖值,并计算血糖曲线下面积(AUC,AUC=0.25×(0h血糖值+4×0.5h血糖值+3×2h血糖值))。

 

3 疏肝健脾颗粒对糖尿病小鼠胰岛素敏感和抵抗的影响

  

分组剂量/g﹒kg-1FBG/mmol﹒L-1FINS/pmol﹒L-1ISIHOMA-IR正常组-9.01±0.6956.29±1.18-6.23±0.0722.53±1.75模型组-21.99±1.9984.50±3.80##-7.52±0.0982.51±7.68##盐酸二甲双胍组0.215.14±0.5474.37±1.56-7.03±0.0450.04±.00疏肝健脾颗粒9.315.26±0.8574.3±2.31-7.03±0.0450.36±1.6318.615.08±0.6074.01±2.11-7.01±0.0449.59±2.19

注:与正常组比较,##p<0.01;与模型组比较,**p<0.01。

3.4 疏肝健脾颗粒对小鼠血脂的影响

表2结果表明,与正常组比较,给药前,各组造模小鼠血糖值均显著升高(P<0.01),血糖值≥16.7mmol/L,表明糖尿病小鼠造模成功。与模型组比较,给药后盐酸二甲双胍组、疏肝健脾颗粒低、高剂量组小鼠血糖值均明显降低(P<.05或P<0.01)。

 

4 疏肝健脾颗粒对糖尿病小鼠胰岛素敏感和抵抗的影响

  

分组剂量/g﹒kg-1TG/mmol﹒L-1TC/mmol﹒L-1HDL-C/mmol﹒L-1正常组-0.78±0.062.04±0.480.094±0.04模型组-1.56±0.53##2.92±0.48##0.048±0.02#盐酸二甲双胍组0.21.12±0.202.17±0.350.080±0.34疏肝健脾颗粒9.31.11±0.302.40±0.430.080±0.0418.61.15±0.272.22±0.400.092±0.06

注:与正常组比较,##p<0.01,#p<0.05;与模型组比较,**p<0.01,*p<0.05。

3.5 疏肝健脾颗粒对小鼠糖耐量的影响

盐酸二甲双胍给药量为0.2g/kg,健脾疏肝颗粒低剂量组、健脾疏肝颗粒高剂量组分别采用9.3g/kg、18.6g/kg的药液灌胃,STZ给予同体积的生理盐水,每日一次,给药4周。

 

5 疏肝健脾颗粒对糖尿病小鼠OGTT的影响

  

组别剂量/g﹒kg-1血糖/mmol·L-10min30min60min120min正常组-5.49±0.3910.34±0.458.27±0.376.31±0.29模型组-20.17±0.39##34.32±1.01##30.95±1.29##24.60±1.03##盐酸二甲双胍组0.210.84±1.8733.84±1.1328.32±2.1121.27±2.03疏肝健脾颗粒9.310.25±1.2232.66±1.5428.49±1.4122.75±1.7618.68.98±1.1532.0±1.1727.66±1.6621.12±1.55

注:与正常组比较,##p<0.01;与模型组比较,**p<0.01,*p<0.05。

4 讨论

糖尿病已成为影响全球健康的疾病之一,其患病率逐年上升,其是一种常见内分泌代谢疾病,具有遗传易感性[3,4]。糖尿病在中医属“消渴”范畴,2型糖尿病发病的根本原因是肝脾肾三脏的功能失调,多属虚实夹杂,正虚多以气阴两虚为主,邪实多以气滞、挟瘀、挟湿为主,故治疗重在协调三脏关系[5]。糖代谢紊乱是糖尿病患者血糖失衡的重要原因之一[6]。糖尿病的代表生化特征是高血糖,是由于肝脏外周组织对葡萄糖的利用减少、肝糖生成增多导致的。

首先将两半柔性橡胶套分别胶接在两半支撑座内壁上,然后将4段波纹软管旋入两半支撑座上的落果端口,再将两半支撑座套在果树树冠以下距地面一定高度的主干上,再把两个紧固喉箍安装在支撑座的限位槽中,同时拧紧紧固喉箍,保证支撑座的位置,再安装固定喉箍保证支撑座上的落果端口位置正确。

本实验采用STZ联合高脂诱导建立糖尿病小鼠模型[7],实验期间小鼠出现“三多一少”症状,血糖水平升高、糖耐量异常、高血脂、胰岛素抵抗增加,敏感性降低,因此需要采取降糖、降脂改善症状。本实验结果显示,疏肝健脾颗粒能够有效降低STZ所导致的糖尿病小鼠血糖,改善糖耐量异常,提高小鼠机体胰岛素的敏感性和降低胰岛素抵抗,且能够调节血脂水平使其恢复正常水平。

SI4133芯片可以通过三线串行总线配置各分频系数。三线串行总线的时钟不能大于25 MHz,因此控制器通过通用IO模拟三线串行总线,设置三线串行总线的时钟为80 kHz,非工作状态电平为高电平,时钟线在上升边沿进行采样。SI4133芯片每次被选中,可以配置一个配置寄存器;其可配置空间为9个寄存器。三线串行总线发送的数据结构如图10所示,发送数据为22 bit,由18 bit数据域与4 bit地址域组成,地址域存放配置数据,地址域存放配置空间的地址。发送配置信息时,数据采用大端模式发送。

综上,疏肝健脾颗粒能够通过改善糖脂代谢提高胰岛素敏感性发挥治疗糖尿病作用。

现代心理学研究指出,一个正常完备的人格角色应当具备三个层次:“首先是生命层次,作为一个人要表现出自然的生命力,健康、蓬勃向上、昂扬、充满力量;其次即社会层次,作为一个社会个体,所处时代的观念、风尚,体现着特定时代的世界观和价值观,即应受到社会的选择;再者是异性审美层次,人类世界的两性,都应受到来自异性的选择,选择的标准不同,但应当是平等的,一个完整的人格应受到这三个力的制约⑧。”然而这种理想的人格在历来传统的女性中没有并出现过。女性生命力的层次在男权社会中被普遍抑制和弱化,女性美是作为一种可供观赏的价值性而存在的,这并非女性本身所固有的一种价值状态。

参考文献

[1]王红梅,闫雅更,董凤丽,吕和,张琳,郭晓微.糖尿病患者发生慢性并发症的危险因素分析[J].医学综述,2018,24(01):175-178+183.

[2]严正松,宋康,徐素美,王苗娟.疏肝健脾颗粒治疗高脂血症的临床观察[J].浙江中医药大学学报,2011,35(04):492-493+495.

[3]中国2型糖尿病防治指南(2013年版)[J].中国糖尿病杂志,2014,22(08):2-42.

[4]侯清涛,李芸,李舍予,田浩明.全球糖尿病疾病负担现状[J].中国糖尿病杂志,2016,24(01):92-96.

[5]赵丹丹,李小可,于娜,方心,穆倩倩,秦培洁,莫芳芳,赵保胜,高思华.降糖消渴颗粒对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(24):172-176.

[6]张世奇.辣椒素对I型糖尿病大鼠糖代谢的影响及其降糖机制的研究[D].西南大学,2017.

[7]FURMAN B L.Streptozotocin-Induced Diabetic Models in Mice and Rats[J].CurrProtocPharmacol,2015,70(5 47 1-20).

 
郭晓纯,陈衍钦,高婷婷
《江西化工》 2018年第02期
《江西化工》2018年第02期文献
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